TÉCNICA Microarray
Tecnologia Microarray que consiste em sequências de DNA (sondas) que são aplicadas a um suporte sólido em spots microscopicamente definidos.
A tecnologia de microarray é uma ferramenta de análise de expressão gênica que permite investigar a expressão de centenas ou milhares de genes em uma amostra com uma reação de hibridização. A tecnologia é baseada na hibridação de alvos marcados derivados de amostras biológicas e uma série de sondas de DNA imobilizadas em uma matriz sólida, que representam os genes de interesse.
Princípio do Teste:
Isolamento do DNA para investigar se o DNA do paciente possui as sequencias específicas para serem analisadas.
Na segunda etapa é realizada a amplificação exponencial da sequência de DNA através da reação em cadeia polimerase (PCR). Duas moléculas de DNA iniciais (primers) definem a região a ser copiada. Se o DNA do paciente contiver a seção correspondente (sequência alvo), os primers se ligam e a sequência alvo é copiada.
Os produtos de PCR resultantes são marcados com um corante fluorescente, o que permite que eles sejam detectados posteriormente pelo microarray.
Na terceira etapa, o DNA amplificado pela PCR é incubado no biochip de Microarray. Primeiramente, o DNA é misturado ao ampão de hibridização, que fornece condições ótimas para a ligação dos produtos de PCR às sondas complementares no microarray. Essa ligação é medida através dos sinais de fluorescência emitidos pelos pontos.
Vantagens:
- Plataforma Array baseada na tecnologia de BIOCHIP
- Componentes PCR prontos para uso
- Procedimento simples
- Incubação padronizada utilizando a técnica TITERPLANE
- Reações de controle integradas asseguram sensibilidade e especificidade para cada amostra do teste.
- Avaliação, interpretação e arquivamento padronizados de resultados totalmente automatizados (software EUROArrayScan).
- Com o EUROArray Direto não é necessário o isolamento do DNA, a análise é performada diretamente de sangue pré-tratado.
- O processo completo desde o recebimento das amostras até a emissão dos resultados é validado por IVD e rotulado com CE (extração de DNA, kits de teste, scanner de microarray, software).